熒光原位雜交

技術簡介

原位雜交(in situ hybridization)是指將特定標記的已知順序核酸為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交，從而對特定核酸順序進行精確定量定位的過程。與傳統的放射性標記原位雜交相比，熒光原位雜交具有快速、檢測信號強、雜交特異性高和可以多重染色等特點。廣泛應用于染色體精細結構變異分析、病毒感染分析、人類產前診斷、腫瘤遺傳學和基因組進化研究等許多領域。

熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization, FISH)則是在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術，以熒光標記取代同位素標記的原位雜交方法，是利用熒光標記的DNA探針來檢測在細胞、組織和腫瘤的特定DNA序列的分子診斷技術。首先將樣本DNA變性，加入特定的熒光標記的探針與變性的樣本混合進行雜交，退火得到雙鏈DNA。探針信號能夠被熒光顯微鏡捕獲，從而定性、定量地檢測目標DNA。與其它用于研究染色體的技術不同，FISH操作靈活，不需要在正在分裂的細胞進行檢測，因而能夠用來檢測基因或染色體是否異常，通常用于遺傳咨詢，醫學和品種鑒定、DNA特定功能研究。利用FISH方法還可檢測非整倍體，微缺失綜合征以及基因重排等，這些指標對遺傳性疾病，如白血病，淋巴瘤，實體瘤，自閉癥等發育綜合征有重要的臨床意義。

實驗原理

熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization, FISH)是20世紀80年代末在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術，以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法，具有安全、快速、靈敏度高、探針保存時間長、能同時顯示多種顏色等優點。

實驗流程

1. 根據客戶送的樣本(固定好或者包埋好)，以及樣本類型，安排實驗

2. 包埋或者切片后，根據客戶所測指標，設計特異性探針，標記示蹤物。然后進行一系列反應

3. (可選)根據上述所做好的切片進行拍片，分為熒光顯微鏡(激光共聚焦顯微鏡)或普通光學顯微鏡

4. (可選)針對做好的玻片進行分析，分析時選取較好的區域，分析三個視野

5. 提供實驗報告：包括詳細的實驗方法及原位雜交實驗結果的相關圖表

周期報價

周期：1-2 周

價格：400 元/張

熒光原位雜交的優勢

高度特異性

極高信噪比

可對多種形式的樣本進行檢測

一張片上展現多種RNA/DNA分子的表達分布和相對豐度

客戶提供

待測樣本信息

待測目的基因序列，GeneID或者Accession Number等

樣本量信息及檢測要求等

樣本運輸要求

冰凍切片：標本放原位雜交固定液中，常溫運輸;冰凍切片-20℃運輸

石蠟切片：標本放原位雜交固定液中，常溫運輸;石蠟切片常溫運輸

細胞爬片：細胞爬片加原位雜交固定液固定15min后，密封，-20℃運輸

新鮮組織：組織取出后可以立即冷凍處理，后干冰運輸

樣品制備

我們為多個FISH應用建立了實驗方案以增強靈敏度和信號，包括：

細胞染色體FISH(間期，中期和培養的細胞)

組織染色體FISH(福爾馬林固定的、石蠟包埋組織切片或細胞玻片)

RNA-FISH(細胞內RNA定位，RNA加工，定量)

結果交付

原始雜交顯色拍照結果圖片

完整的實驗報告，包括實驗過程、所用儀器試劑、蠟塊玻片和相關分析數據

項目案例

服務承諾

1. 會在最短的時間內快速將實驗完成。

2. 保證檢測結果準確、客觀、可信，但不能確保一定要得到某特定結果。