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想檢測(cè)實(shí)驗(yàn)樣本中的靶蛋白，但是ELISA、WB、IHC傻傻分不清，到底應(yīng)該選擇哪種方法呢？又該如何開(kāi)展實(shí)驗(yàn)?zāi)兀?/p>

本文幫大家總結(jié)整理了ELISA、WB、IHC的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)流程，幫大家順利搞定實(shí)驗(yàn)！

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）、蛋白免疫印跡（WB）、免疫組化（IHC），是免疫學(xué)三大常用工具，應(yīng)用于目的蛋白的定量、定性和定位分析。

這三種免疫學(xué)檢測(cè)手段，都是基于抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，其差異性在于：

◆ ELISA更適合定量檢測(cè)胞外的分泌性蛋白

◆ WB多用于胞膜、胞漿或胞核蛋白的半定量檢測(cè)

◆ IHC主要用于胞蛋白的定位

下面分為為大家介紹三大實(shí)驗(yàn)

蛋白免疫印跡（WB）

WB(Western Blot，蛋白免疫印跡)利用靶蛋白分子量大小不同的原理，用SDS-PAGE（凝膠電泳）分離蛋白質(zhì)，將分離開(kāi)的蛋白質(zhì)用電轉(zhuǎn)儀轉(zhuǎn)移到固相載體（膜）上，然后利用抗原-抗體-標(biāo)記物顯色來(lái)檢測(cè)目標(biāo)蛋白含量。WB多用于胞膜、胞漿或胞核蛋白的定性和半定量檢測(cè)。

免疫組化（IHC）

IHC(Immunohistochemistry，免疫組織化學(xué)技術(shù))融合了免疫學(xué)原理（抗原抗體特異性結(jié)合）和組織學(xué)技術(shù)（組織的取材、固定、包埋、切片、脫蠟、水化等），通過(guò)化學(xué)反應(yīng)，使標(biāo)記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色，來(lái)對(duì)組織（細(xì)胞）內(nèi)抗原進(jìn)行定位、定性及定量的研究，其主要對(duì)胞內(nèi)蛋白進(jìn)行定位。

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）

ELISA運(yùn)用了免疫學(xué)原理和化學(xué)反應(yīng)顯色原理，需要將抗原或抗體預(yù)包被在固相載體表面，使后來(lái)形成的抗原-抗體-酶（熒光基團(tuán)）-底物復(fù)合物黏附在載體上，通過(guò)檢測(cè)OD值或發(fā)光值，來(lái)檢測(cè)靶蛋白的含量。ELISA更適合定量檢測(cè)胞外的分泌性蛋白。

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