質(zhì)譜級(jí)賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶
Lysyl Endopeptidase
本產(chǎn)品是質(zhì)譜分析前處理時(shí)最常用的蛋白分解酶即賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶，該酶可以特異性切除賴氨酸基團(tuán)C末端的多肽，可用于蛋白測(cè)序分析和Lys-X化合物的酶合成。若同時(shí)使用賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶和胰酶，可更好地切斷賴氨酸 基團(tuán)的多肽，增加多肽的數(shù)量。產(chǎn)品已按照使用習(xí)慣做成小包裝，是方便使用的冷凍干燥品。
外觀：凍干粉（包含2 mmol/L Tris-HCl緩沖液，pH 8）分子量：27,000(瓊脂糖過(guò)濾)，30,000（SDS-PAGE）穩(wěn)定性：溶解于pH值5.0-12.0的Tris緩沖液中，可在4℃穩(wěn)定保存2年；在pH值6.0-11.0 30℃時(shí)能穩(wěn)定保存，但溫度超過(guò)50℃時(shí)不穩(wěn)定。可水解底物——Tos-Lys-OMe,Bz-Lys-NH2,Bz-Lys-pNA,Lys-pNA不可水解底物——Bz-Arg-NH2,Bz-Arg-pNA,Arg-pNA
● 高特異性、高蛋白質(zhì)消化率、適用于蛋白質(zhì)譜分析
分別采用胰蛋白酶(Tp)、賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶 (Lys-C) 和Tp與Lys-C聯(lián)用進(jìn)行膠內(nèi)酶切的效果比較。牛血清蛋白BSA 的條帶(100 ng) 通過(guò)SDS-PAGE 獲得，然后分別用Tp、Lys-C和Lys-C+Tp進(jìn)行酶切，再用MALDI-TOFMS法進(jìn)行分析。這些蛋白酶的實(shí)驗(yàn)效果見(jiàn)下表。表 1：Tp、Lys-C和Lys-C+Tp的結(jié)果對(duì)照這些結(jié)果表明Lys-C酶解的錯(cuò)誤裂解率最低。Tp酶解時(shí)加入Lys-C后，錯(cuò)誤裂解率有所降低，同時(shí)，可以鑒定出更多的多肽。
胰蛋白酶 (Tp)( 圖 a) 和賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶 (Lys-C)+Tp ( 圖 b) 酶切后的質(zhì)譜結(jié)果對(duì)照?qǐng)D。
Lys-C+Tp酶切后，可以在m/z=2000時(shí)得到吸收峰，而單獨(dú)的Tp酶切在m/z=2000時(shí)沒(méi)有吸收峰。該結(jié)果表明Lys-C可以提高測(cè)序覆蓋度。( 數(shù)據(jù)由大阪醫(yī)療中心和婦嬰健康研究所Y. Wada博士提供 )
賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶，最初由Masaki 等人從土壤細(xì)菌中分離得到。該酶可以特異性剪切賴氨酸殘基C 末端和S-氨乙基半胱氨酸殘基的肽鍵，用于蛋白測(cè)序和Lys-X化合物的酶催化合成。該酶穩(wěn)定性高，在4M 尿素或0.1%SDS 溶液中30℃孵育6小時(shí)之后，仍然擁有完整的生物活性。
| 品牌 | 編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品等級(jí) |
| FUJIFILM Wako | 125-05061 | 賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶，MS級(jí) | 20 μg×5 | 質(zhì)譜級(jí) |
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