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DO Supplement-Leu/-Met/-Trp
  • 產(chǎn)品貨號(hào):
    BN25184
  • 中文名稱:
    DO Supplement-Leu/-Met/-Trp
  • 品牌:
    Biorigin
  • 貨號(hào)

    產(chǎn)品規(guī)格

    售價(jià)

    備注

  • BN25184-20g

    20g

    ¥498.00

    DO三缺氨基酸

產(chǎn)品描述

一、酵母培養(yǎng)基種類及用途 

一缺培養(yǎng)基 

     用于單質(zhì)粒酵母轉(zhuǎn)化篩選,外源基因在酵母中的表達(dá)、異源基因功能互補(bǔ)、酵母單雜交和酵母雙雜交初始質(zhì)粒轉(zhuǎn)化。 

二缺培養(yǎng)基 

     用于雙質(zhì)粒酵母轉(zhuǎn)化篩選,外源基因在酵母中的表達(dá)、異源基因功能互補(bǔ)、酵母單雜交和酵母雙雜交初始質(zhì)粒轉(zhuǎn)化免疫共沉淀,Y187、AH109/Y2HGold、NMY51 酵母雜交實(shí)驗(yàn), 接合型二倍體篩選。 

三缺培養(yǎng)基 

     用于雙質(zhì)粒酵母轉(zhuǎn)化篩選和報(bào)告基因檢測(cè),外源基因在酵母中的表達(dá)、異源基因功能互 補(bǔ)、酵母單雜交和雙雜交報(bào)告基因檢測(cè),Y187、AH109/Y2HGold、NMY51 酵母交配實(shí)驗(yàn)后報(bào) 告基因分析(His3,Ade2)。 

四缺培養(yǎng)基 

     用于報(bào)告基因分析,酵母雙雜交和酵母三雜交報(bào)告基因檢測(cè),Y187、AH109/Y2HGold、NMY51 酵母交配實(shí)驗(yàn)后報(bào)告基因分析(His3,Ade2)。 

五缺培養(yǎng)基 

     用于報(bào)告基因分析和表型分析,酵母三雜交報(bào)告基因檢測(cè)(His3,Ade2)、酵母營(yíng)養(yǎng)缺 陷型分離鑒定和表型分析。 

六缺培養(yǎng)基 

     用于報(bào)告基因分析、表型分析和藥物毒理分析,酵母三雜交報(bào)告基因檢測(cè)、酵母營(yíng)養(yǎng)缺 陷型分離鑒定和表型分析、藥物毒理分析。

Rich medium 

     Rich medium 包括 YPD、YPDA、YPD Plus 系列培養(yǎng)基,也可以稱為完全培養(yǎng)基。 YPD Medium 由精選的蛋白胨、酵母提取物和葡萄糖按適當(dāng)比例混合組成;YPDA 培養(yǎng)基是 在 YPD 培養(yǎng)基中添加了適量的硫酸腺嘌呤;YPD Plus 相比于 YPDA 的營(yíng)養(yǎng)更為豐富, 可直接用于釀酒酵母感受態(tài)的復(fù)蘇,可以提高轉(zhuǎn)化效率。YPD Agar、YPDA Agar 分別在 YPD、YPDA 基礎(chǔ)上加入了 Agar,作為固體培養(yǎng)基倒板用。YPD 系列培養(yǎng)基用于釀酒酵母 的常規(guī)培養(yǎng)。

二、酵母培養(yǎng)基的配制 

(1) Rich Liquid Media (Broth) 

     1. 取 50g 的 YPD/YPDA 加 1L 的去離子水中溶解; 

     2. 調(diào)節(jié) pH 至 6.5,121℃高壓滅菌 15min; 

     3. 避光、室溫條件下儲(chǔ)存滅菌培養(yǎng)基。 

(2) Rich Plating Media with Agar 

     1. 取 70g 的 YPD Agar/YPDA Agar 加 1L 的去離子水中溶解(瓊脂在高溫滅菌后溶解); 

     2. 調(diào)節(jié) pH 至 6.5,121℃高壓滅菌 15min; 

     3. 冷卻到 50℃把培養(yǎng)基倒入平板中,室溫使其凝固,封口膜封好后倒置保存在 4℃冰箱。

(3) Minimal SD Base 

     1. 在 1L 去離子水中加入 26.7g 的 Minimal SD Base,然后再加入相應(yīng)量的缺陷氨基酸, 攪拌溶解; 

     2. 調(diào)節(jié) pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min; 

     3. 避光、室溫條件下儲(chǔ)存滅菌培養(yǎng)基。 

(4) Minimal SD Agar Base 

     1. 在 1L 去離子水中加入 46.7g 的 Minimal SD Base,然后再加入相應(yīng)量的缺陷氨基酸, 攪拌溶解; 

     2. 調(diào)節(jié) pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min; 

     3. 冷卻到 50℃把培養(yǎng)基倒入平板中,室溫使其凝固,封口膜封好后倒置保存在 4℃冰箱。

(5) DO(缺陷氨基酸)類培養(yǎng)基的配制 

     1. 在 1L 去離子水中加入相應(yīng)量的 DO 培養(yǎng)基,然后再加入 26.7g Minimal SD Base,攪拌 溶解; 

     2. 調(diào)節(jié) pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min; 

     3. 4℃冰箱避光儲(chǔ)存已經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基。

     或:1. 在 900ml 去離子水中加入相應(yīng)量的 DO 培養(yǎng)基,然后再加入 6.7g YNB,攪拌溶解; 

     2. 調(diào)節(jié) pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min;

     3. 4℃冰箱避光儲(chǔ)存已經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基; 

     4. 使用時(shí)再加入 100ml 已滅菌的 20%葡萄糖。

(6) SC(缺陷氨基酸+YNB)類培養(yǎng)基的配制

     1. 在 1L 去離子水中加入相應(yīng)量的 SC 培養(yǎng)基,然后再加入 20g 葡萄糖,攪拌溶解; 

     2. 調(diào)節(jié) pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min; 

     3. 4℃冰箱避光儲(chǔ)存已經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基;

     或:1. 在 900ml 去離子水中加入相應(yīng)量的 SC 培養(yǎng)基,攪拌溶解; 

     2. 調(diào)節(jié) pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min; 

     3. 4℃冰箱避光儲(chǔ)存已經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基; 

     4. 使用時(shí)再加入 100ml 已滅菌的 20%葡萄糖。 

(7) SD(缺陷氨基酸+YNB+葡萄糖)類培養(yǎng)基的配制 

     1. 在 1L 去離子水中加入相應(yīng)量的 SD 培養(yǎng)基,攪拌溶解; 

     2. 調(diào)節(jié) pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min; 

     3. 4℃冰箱避光儲(chǔ)存已經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基。 

(8) SD with Agar(缺陷氨基酸+YNB+葡糖糖+Agar)類培養(yǎng)基的配制 

     1. 在 1L 去離子水中加入相應(yīng)量 SD with Agar 培養(yǎng)基,攪拌溶解(瓊脂在高溫滅菌后溶解);

     2. 調(diào)節(jié) pH 至 5.8,121℃高壓滅菌 15min;

     3. 冷卻到 50℃把培養(yǎng)基倒入平板中,室溫使其凝固,封口膜封好后倒置保存在 4℃冰箱。

注意事項(xiàng): 

     1. 在配制酵母缺陷培養(yǎng)基時(shí),培養(yǎng)基會(huì)變色,由淺黃到深褐色不等,對(duì)酵母的生長(zhǎng)不會(huì)產(chǎn) 生嚴(yán)重影響。 

     2. DO 類和 SC 類培養(yǎng)基均不含葡萄糖。葡萄糖高溫滅菌會(huì)有碳化現(xiàn)象,控制好滅菌溫度和時(shí)間,葡萄糖的微量碳化對(duì)實(shí)驗(yàn)并無(wú)太大影響。如有特殊要求可將 20%葡萄糖單獨(dú)滅菌,待使用時(shí)再加入。

     3. 缺陷培養(yǎng)基的 PH 值在 5.5-6.5 范圍內(nèi)都是比較適合酵母生長(zhǎng)的,此類試劑粉末的 PH 已 經(jīng)過(guò)調(diào)試,使用時(shí)只需要稍微調(diào)整即可。

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